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染色液的具体染色步骤分享
更新时间:2022-04-26 点击次数:1337次
染色液适用于各种细胞、组织石蜡切片、冰冻切片、火胶棉切片、树脂切片、涂片、印片的染色,用于临床病理学辅助诊断。
染色液的检验原理:
细胞中的细胞核由带负电荷的酸性物质组成,与带正电荷的碱性染料苏木素的氧化物三氧化苏木红有较强的亲和力;而细胞浆则相反,因含有带正电荷的碱性物质而与带负电的酸性染料曙红Y的亲和力较强;细胞或组织切片经HE染色后,细胞核被染成蓝紫色,细胞浆、红细胞、肌纤维、胶原纤维、结缔组织、嗜伊红颗粒等被染成不同程度的红色、粉红色或橙红色,与蓝色的细胞核形成鲜明的对比,因此更易于观察细胞或组织中正常成份和病变成份的一般形态结构。
染色液的储存条件及有效期:
常温密封避光保存,用后盖紧瓶盖以防染色液挥发,有效期为一年。
染色液的适用仪器:
光学显微镜
染色液的样本要求:
细胞涂片或组织切片应均匀,厚度适中,并充分固定。石蜡切片必须充分脱蜡。
染色液的染色步骤:
1、石蜡切片置于二甲苯Ⅰ、Ⅱ中各5~10min;
2、95%乙醇Ⅰ、Ⅱ各1~2min;
3、自来水浸泡或冲洗2min;
4、苏木素染色液染5min,自来水冲洗去掉多余的染色液;
5、0.25%盐酸酒精速过分化,迅速用自来水冲洗;
6、饱和Li2CO3返蓝30s,自来水冲洗;或自来水冲洗(或浸泡)10min返蓝;
7、95%乙醇脱水两次,共1min;
8、伊红染色液染5~10s;
9、95%乙醇分色两次,各10~30s;
10、无水乙醇脱水两次,共5min;
11、浸入二甲苯或二甲苯替代物中透明两次,各5min;
12、滴一滴中性树胶,盖上盖玻片封片;
13、光学显微镜下观察。
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